新生牛血清的解凍方法

      瓶裝新生(sheng)牛(niu)血清解(jie)凍需采用緩慢解(jie)凍法：把在-15~-40℃低溫(wen)(wen)冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解(jie)凍約(yue)1天，待全(quan)部解(jie)凍后再分裝。在解(jie)凍過(guo)程中每隔約(yue)2小時可輕輕搖晃均勻(盡(jin)量(liang)避免產生(sheng)氣泡)，使溫(wen)(wen)度與成分均一，減少沉淀的發(fa)生(sheng)。切勿(wu)直接將血清從(cong)-20℃或更低溫(wen)(wen)度進入37℃水浴(yu)解(jie)凍，這樣因溫(wen)(wen)度改(gai)變太大，容易造成蛋白質凝集而(er)出(chu)現沉淀，從(cong)而(er)使用血清的質量(liang)下降。

      新生牛血清中的絮(xu)狀沉淀物主要是解凍后(hou)血清中纖維蛋白(bai)及4℃長時間(jian)保存后(hou)血清中的脂蛋白(bai)變性造成(cheng)的，這些絮(xu)狀物不(bu)會(hui)影響血清本身的質量(liang)，可不(bu)用處理。如果必須(xu)要處理，可400g離心5分(fen)鐘去除。但不(bu)宜(yi)過濾去除，因為絮(xu)狀物可能(neng)阻塞濾膜。

      經過熱處(chu)理(li)的新生(sheng)(sheng)(sheng)牛血清中沉淀(dian)物(wu)(wu)會顯(xian)(xian)著增多(duo)。有些沉淀(dian)物(wu)(wu)在(zai)顯(xian)(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察像“小(xiao)黑(hei)點(dian)”，而且由于這些“小(xiao)黑(hei)點(dian)”的布朗運動(dong)在(zai)顯(xian)(xian)微(wei)鏡下(xia)被(bei)放大，感覺是(shi)(shi)(shi)在(zai)游動(dong)，所(suo)以經常被(bei)誤認(ren)為血清被(bei)微(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)污(wu)(wu)染。通(tong)常這些小(xiao)黑(hei)點(dian)不會影響(xiang)細胞(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)長，但(dan)如(ru)果懷疑(yi)血清存在(zai)微(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)污(wu)(wu)染，則應立即停止使用(yong)，更換另一批次的血清。可將(jiang)適量血清用(yong)培養(yang)液稀釋至(zhi)10%濃(nong)度后培養(yang)1-3天，觀察小(xiao)黑(hei)點(dian)是(shi)(shi)(shi)否急劇增多(duo)，或取(qu)適量血清在(zai)LB平板上涂板培養(yang)觀察是(shi)(shi)(shi)否產生(sheng)(sheng)(sheng)菌落，以確定是(shi)(shi)(shi)否存在(zai)微(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)污(wu)(wu)染。

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