2022-07-06
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常見的動物血清九個問題和解決辦法


①通常(chang)情況下,融化的動(dong)物(wu)血清外觀應當是什么顏色?

動物(wu)(wu)血清是(shi)來源(yuan)于動物(wu)(wu),成分復雜(za),不同批次之間(jian)外觀存在(zai)一定差異。通(tong)常它們的顏(yan)色(se)(se)可能是(shi)金黃色(se)(se)、紅色(se)(se)、琥(hu)珀色(se)(se)或介于兩者(zhe)之間(jian)。

②應(ying)當怎樣(yang)保存動物血清?

未開封的動物血清應貯存在-15至-20℃下,以避免反復凍融。未包裝的動物血清應無菌(jun)分(fen)裝(zhuang)成一劑,貯存于-15℃至-20℃,在(zai)產品質量證明書標(biao)明的有效(xiao)期內可(ke)以使用(yong)。康那建議(yi)在(zai)2-8℃溶(rong)解后盡快使用(yong)。

③怎樣(yang)使動物血清失活(huo)?

請遵循應當怎(zen)樣融(rong)化動(dong)物血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)的(de)(de)步驟來融(rong)化和(he)混合動(dong)物血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing),并(bing)在(zai)加熱(re)失活時(shi)將動(dong)物血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)放入56℃的(de)(de)水(shui)(shui)(shui)浴中(zhong)30分鐘。為(wei)了盡量減少熱(re)滅活對動(dong)物血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)質(zhi)量的(de)(de)影響(xiang),一次(ci)滅活的(de)(de)動(dong)物血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)體積不宜過大。最好是(shi)準(zhun)備同(tong)一個容(rong)器(qi),水(shui)(shui)(shui)的(de)(de)體積相等,動(dong)物血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)的(de)(de)溫(wen)(wen)度相同(tong)。滅活時(shi),將裝有動(dong)物血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)和(he)水(shui)(shui)(shui)的(de)(de)容(rong)器(qi)同(tong)時(shi)放入56℃的(de)(de)水(shui)(shui)(shui)浴中(zhong),在(zai)裝有水(shui)(shui)(shui)的(de)(de)容(rong)器(qi)中(zhong)放置溫(wen)(wen)度計,加熱(re)過程中(zhong)不時(shi)輕輕旋轉攪拌(ban)動(dong)物血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)。當溫(wen)(wen)度計顯(xian)示達到56℃左右時(shi),開(kai)始(shi)計時(shi)。56℃水(shui)(shui)(shui)浴后(hou),康(kang)那建議立即轉移(yi)到冰上降溫(wen)(wen)。

④動物血清的(de)有效(xiao)期(qi)有多長(chang)時(shi)間?

大多數動(dong)物血清的有效(xiao)(xiao)期為5年。對(dui)于每一(yi)批,請(qing)通過康那生(sheng)(sheng)物技術質量(liang)檢驗文件確定具(ju)體的生(sheng)(sheng)效(xiao)(xiao)時(shi)間。

⑤為(wei)何動(dong)物血(xue)清中(zhong)有時會出現絮狀沉(chen)淀?需要怎么去除(chu)?

許(xu)多原(yuan)因(yin)都(dou)可能導致絮狀沉淀的形(xing)成(cheng),其中一個(ge)最(zui)常見的原(yuan)因(yin)是融化過程中脂蛋白的聚集(ji)。這種情況(kuang)通常并不會影響產品質量(liang)。以400g離心(xin)5分鐘(zhong),收集(ji)上清液,然后過濾。根據需要選(xuan)擇合適的濾膜孔。

通(tong)常最常用的濾膜直(zhi)徑是0.22um的PES材質。為(wei)避免濾膜堵塞,康那建(jian)議離心(xin)后取上清(qing)(qing)液加(jia)入培養基中(zhong)一起過濾,不要(yao)直(zhi)接過濾動物血清(qing)(qing)。

⑥為何貯存在(zai)冰箱(xiang)里的動(dong)物血清會沉淀?怎樣應(ying)對這種(zhong)情況?

當(dang)貯存在(zai)(zai)2-8°C時,動(dong)(dong)(dong)物(wu)(wu)血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)中(zhong)的(de)(de)(de)多種蛋白質或脂蛋白會(hui)形(xing)成(cheng)肉眼可(ke)見的(de)(de)(de)沉(chen)淀,如(ru)纖維蛋白。單(dan)(dan)體處(chu)于溶解狀態(tai),在(zai)(zai)凍(dong)融(rong)過程(cheng)中(zhong)會(hui)發(fa)生(sheng)聚集(ji),形(xing)成(cheng)肉眼可(ke)見的(de)(de)(de)沉(chen)淀物(wu)(wu)。只(zhi)不過這(zhe)種情況通(tong)常并不會(hui)影響動(dong)(dong)(dong)物(wu)(wu)血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)的(de)(de)(de)性能。以400g離心5分鐘,收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)(qing)(qing)液,然后過濾(lv)。根(gen)據需要選擇(ze)合適的(de)(de)(de)濾(lv)膜(mo)(mo)(mo)孔徑(jing),最常用(yong)的(de)(de)(de)濾(lv)膜(mo)(mo)(mo)是(shi)0.22um的(de)(de)(de)PES。為避(bi)免(mian)濾(lv)膜(mo)(mo)(mo)堵塞,康那(nei)建(jian)議離心后取(qu)上(shang)清(qing)(qing)(qing)液加入培養基中(zhong)一起過濾(lv),不要直接過濾(lv)動(dong)(dong)(dong)物(wu)(wu)血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)。為避(bi)免(mian)上(shang)述所說現象,康那(nei)生(sheng)物(wu)(wu)建(jian)議單(dan)(dan)劑(ji)量動(dong)(dong)(dong)物(wu)(wu)血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)應保(bao)存在(zai)(zai)-15℃至-20℃的(de)(de)(de)冰箱中(zhong),反復凍(dong)融(rong)后的(de)(de)(de)動(dong)(dong)(dong)物(wu)(wu)血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)應長期保(bao)存在(zai)(zai)2-8℃。

⑦應當怎樣(yang)融(rong)化動物血清?

將康.那動物血(xue)清從冰箱中(zhong)取出,在2-8℃融(rong)化。在熔化過程中(zhong),不(bu)時旋(xuan)(xuan)轉(zhuan)旋(xuan)(xuan)轉(zhuan)的混(hun)合物,使其混(hun)合均勻。完全融(rong)化后,包裝(zhuang)或平衡至室溫備(bei)用(yong)。

⑧動物血清需(xu)要滅活嗎?這(zhe)取決于您的(de)應用。

在(zai)(zai)滅活(huo)過(guo)(guo)程(cheng)中(zhong),動(dong)物(wu)血(xue)清(qing)中(zhong)的(de)一些成分(fen)會(hui)被破(po)壞,如氨(an)基(ji)酸(suan)、維(wei)生(sheng)素、生(sheng)長因子等。所以(yi),只有當你的(de)實驗對(dui)動(dong)物(wu)血(xue)清(qing)有特殊要求時,才(cai)會(hui)考慮(lv)將動(dong)物(wu)血(xue)清(qing)滅活(huo)。如果你的(de)實驗對(dui)動(dong)物(wu)血(xue)清(qing)中(zhong)的(de)某種成分(fen)敏感(gan),就需(xu)(xu)要去除。最常見的(de)情況是需(xu)(xu)要清(qing)除動(dong)物(wu)血(xue)清(qing)中(zhong)的(de)補體蛋白。由于(yu)補體在(zai)(zai)體內參與細(xi)(xi)胞(bao)殺(sha)傷(shang)、巨噬細(xi)(xi)胞(bao)和淋(lin)巴細(xi)(xi)胞(bao)激活(huo)、肥(fei)大細(xi)(xi)胞(bao)和血(xue)小板釋放組胺、平滑肌收縮等過(guo)(guo)程(cheng),所以(yi)在(zai)(zai)免疫學(xue)相關研究(jiu)中(zhong),以(yi)及(ji)在(zai)(zai)培養肌細(xi)(xi)胞(bao)和干(gan)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)過(guo)(guo)程(cheng)中(zhong),通常需(xu)(xu)要滅活(huo)康那(nei)動(dong)物(wu)血(xue)清(qing)。

⑨怎樣處理動(dong)物血清的批次差異性?

動物(wu)血(xue)(xue)清(qing)的質量控制很嚴格(ge),以盡量減少(shao)批間差(cha)異(yi)性(xing),但由(you)于動物(wu)血(xue)(xue)清(qing)本身的特性(xing)和來源,批間差(cha)異(yi)性(xing)無法完全避免。客(ke)戶(hu)可以通(tong)過做預(yu)試驗等選擇(ze)符合要求的動物(wu)血(xue)(xue)清(qing)批次。


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